Ing sintesis DNA, RNA lan asam nukleat non-alam sing khas, langkah Deprotection lan Coupling nduweni peran penting.
Langkah Deprotection kanggo mbusak gugus DMT ing support ngalangi utawa 5' gugus hidroksil ing nukleosida sadurungé karo asam organik, lan kapapar gugus hidroksil kanggo langkah kopling ing ngisor iki.Asam trichloroacetic 3% ing dichloromethane utawa toluene biasane digunakake kanggo nindakake langkah deproteksi.Konsentrasi asam trichloroacetic lan wektu deproteksi (wektu deblocking) ndominasi kemurnian produk pungkasan.Konsentrasi sing kurang lan wektu deblocking ora cukup ninggalake klompok DMT sing ora reaksi, sing nyuda asil lan nambah impurities sing ora dikarepake.Wektu deblocking sing dawa bisa nyebabake depurine saka urutan sing disintesis, mbentuk impurities sing ora dikarepake.
Langkah Coupling sensitif marang isi banyu pelarut lan kelembapan ing udhara.Konsentrasi banyu ing sintesis kudu kurang saka 40 ppm, luwih apik kurang saka 25 ppm.Kanggo njaga kondisi sintesis anhidrat, sintesis asam nukleat kudu ditindakake ing lingkungan sing asor, mula disaranake para pelanggan nggunakakePeralatan Dibubarake Amidites, kang bisa dissolve ing powdered utawa lengo Phosphoramidite ing anhydrous acetonitrile supaya kontak karo udhara.
Wiwit dissolve saka phosphoramidites iku luwih apik ing kahanan non-banyu, lan traps molekul kanggo adsorb tilak banyu ing reagen lan amidite, iku perlu kanggo nyiyapakePerangkap Molekul.Disaranake 2 g subsieve kanggo botol reagen 50-250ml, 5g kanggo botol reagen 250-500ml, 10g kanggo botol reagen 500-1000ml, lan 20g kanggo botol reagen 1000-2000ml.
Dissolve phosphoramidites kudu ditindakake ing atmosfer inert, lan ngganti reagen aktivator lan asetonitril kudu rampung ing wektu.Reagen Capping lan Oksidasi kudu digunakake sanalika bisa, reagen sing dibukak menehi umur simpan sing kurang, lan kurang aktivitas sajrone sintesis.
Wektu kirim: Aug-09-2022